病原学检查

　　1.痰涂片显微镜检查

　　痰标本涂片萋一尼染色找抗酸杆菌具有快速、简便等优点。厚涂片可提高检测阳性率。荧光染色检查不需油镜，视野范围广，敏感性高于抗酸染色，但易有假阳性。

　　抗酸染色直接镜检不能区分结核和非结核分枝杆菌（nontubercu1ous mycobacteria），但在我国非结核分枝杆菌病相对较少，涂片找到抗酸杆菌绝大多数为结核杆菌，可以提示诊断。规定观察300个视野，油镜下所见判断检验结果标准：0条／300视野（阴性）；1-2条／300视野（可疑阳性）；3～9条／100视野（+）；1～9条／10视野（++）；1～9条／视野（+++）；≥10条／视野（++++）。除了痰标本外，脓液、病灶组织、纤支镜刷检物、冲洗或灌洗液均可用于直接涂片检查。

　　2.结核菌培养

　　结核菌培养法具有很高敏感性和特异性。培养后可进行药敏测试。随着耐多药结核菌增多，药敏愈显重要。近来应用BacteeTB460系统，在含放射性14 C棕榈酸底物的Th.分枝杆菌培养基，由于分枝杆菌产生带有放射性14C，进行测定和推算。新的Bactee MGIT960系统以荧光素取代14C，可以避免核素污染。Bactec TB系统培养结核菌阳性报告时间较普通培养缩短10天左右，药敏通常在培养阳性后的4～6天即可完成，且能快速将结核菌和非结核分枝杆菌加以鉴别。

　　3.分子生物学检测

　　聚合酶链反应（PCR）技术可以将标本中微量的结核菌DNA加以扩增。一般镜检仅能检测104～105条菌／毫升，而PCR可检出1-100fg结核菌DNA（相当于1～20条菌／毫升）。但DNA提取过程遭遇污染等技术原因可以出现假阳性，而且PCR无法区别活菌和死菌，故不能用于结核病治疗效果评估、流行病学调查等。目前PCR检测仅推荐在非结核分枝杆菌病高发地区涂片抗酸杆菌阳性病例用来快速区分结核与非结核分枝杆菌。已有商用结核菌eDNA探针，由于实验操作复杂等原因尚未在临床上应用。核酸指印技术（eDNA finger printing）采用限制性内切酶片段多态性分析（restriction fragment 1ength po1ymorphism，RP1P），可用于鉴定所分离到的结核菌是否同源，用于流行病研究。

　　4.结核菌

　　抗原和抗体检测采用E1ISA方法检测痰标本中结核菌抗原的结果差异甚大，可能与痰标本中结核菌抗原分布不甚均匀有关。采用不同的抗原检测肺结核患者血标本中结核菌IgG的敏感性为24％-100％不等，特异性为71％-100％。我国采用PPD作为抗原检测结核菌IgG，敏感性和特异性分别为60％-80％和90％，抗体检测主要是用于临床和X线影像学疑为肺结核而不易获得痰标本的儿童及痰涂阴性肺结核患者的诊断参考。