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以免疫方法取代测酶活性方法

2014-06-18 15:57  来源:医学教育网    打印 | 收藏 |
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以免疫方法取代测酶活性方法

免疫学方法和经典测酶活性方法相比最突出的优点是:免疫学方法能测定一些不表现酶活性的酶蛋白质,这在以前是不能想象的。首先是各种酶原,还有去辅基酶蛋白(apoenzyme)以及一些灭活的酶蛋白裂解产物等等。例如已有用RIA法测胰蛋白酶原。也有用免疫学方法测定线粒体和胞质谷草转氨酶,这其中包括无酶活性的去辅基谷草转氨酶。

免疫学方法另一特点是特异性高医学教|育网搜集整理,且不受体液中其它物质,特别是抑制剂、激活剂的干扰。不少蛋白水解酶或者对基质特异性不高,或者易受血中一些蛋白质如α1-抗胰蛋白酶、α2-巨球蛋白的抑制作用。用测酶活性方法不易准确定量甚至无法测定。在近年来用免疫学方法陆续建立了RIA测胰蛋白酶、弹性蛋白酶的方法。

一般说来和测酶活性相比,免疫学方法灵敏度更高一些。一些既往由于方法学灵敏度差,不易测定的酶可以尝试改用免疫学方法,脂肪酶是其中例子之一。经典测酶活性方法由于灵敏度差,酶温育时间长达24小时,几经修改仍需4小时,现已有RIA法脂肪酶试剂盒。近年来随着优生学发展,羊水中各种成分包括酶的测定日益受到重视。例如在Tay-Sachs综合征时,胚胎组织细胞中氨基已糖苷同工酶A或(和)B合成障碍,免疫学方法由于灵敏度高,可以比测酶活性方法早几周在胎儿的羊水中查出此酶的缺陷。

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